Tại sao cần làm tiêu bản mẫu khô

Dùng kim mũi mác rạch đứt một đường nông trên bề mặt cần bóc, sau đó bóc lấy 1 lớp tế bào biểu bì của lá cây; đặt tiêu bản lên giữa phiến kính đã nhỏ sẵn 1 giọt dung dịch lên tiêu bản (nước cất hoặc glycerin) rồi đậy lá kính lại (theo phương pháp giọt ép) và quan sát dưới kính hiển vi.

Phương pháp cắt

Cắt trực tiếp 

Mẫu được đặt lên một “thớt” (làm bằng vật liệu có độ cứng nhỏ hơn lưỡi dao cạo như gỗ hoặc khoai lang, v.v.), dùng lưỡi dao cạo cắt thành những lát mỏng. Các lát cắt sau đó được ngâm ngay vào đĩa petri đã có sẵn nước cất.

Cắt bằng máy cắt cầm tay (microtom), theo quy trình sau

Chuẩn bị cốt khoai:

1. Dùng dao bài gọt một lõi khoai lang hình trụ, dài 2 – 3cm, sao cho vừa khít ống máy cắt.
2. Chẻ đôi lõi khoai này theo chiều dọc thành 2 nửa đều nhau.

Cố định mẫu tiêu bản vào cốt khoai:

1. Khoét ở cả hai mặt phẳng mới chẻ đôi này, theo chiều dọc, một khe nhỏ theo hình của mẫu tiêu bản cần cắt, sao cho khi ghép hai mảnh khoai này lại thì mẫu cần cắt được giữ chặt.
2. Kẹp mẫu cần cắt vào giữa 2 miếng khoai rồi cho vào ống của máy cắt.

Cắt tiêu bản

1. Để mặt phẳng của lưỡi dao áp sát với mặt phẳng của máy cắt, nghiêng một góc 450 kéo chéo từ trái sang phải , cắt qua cốt khoai.
2. Sau mỗi lần cắt, vặn ốc của máy cắt theo chiều kim đồng hồ để đẩy cốt khoai lên một chút. Mức độ vặn ít hay nhiều sẽ cho lát cắt tiêu bản mỏng hay dầy.
3. Dùng kim chổi lông gạt vi phẫu đã cắt ngay vào đĩa petri có sẵn nước cất. Sau đó dùng chổi lông chọn lấy các lát cắt chuyển sang mặt kính đồng hồ đã có sẵn cloramin bão hòa
   (Cloramin B) hoặc dung dịch Javen.

Tẩy và nhuộm tiêu bản

Tẩy

1. Tẩy mẫu bằng dung dịch Cloramin B trong thời gian ít nhất là 30 phút. Rửa sạch Cloramin 3 lần bằng nước cất. Nếu mẫu chứa nhiều tinh bột có thể ngâm trong dung dịch cloran hydrat trong 30 phút, sau đó rửa sạch.
2. Ngâm mẫu trong acid acetic trong 15 phút. Rửa sạch mẫu 3 lần bằng nước cất.

Nhuộm

1. Nhuộm màu xanh bằng dung dịch xanh Methylen. Thời gian từ 5-30 giây. Rửa sạch mẫu 3 lần bằng nước cất.
2. Nhuộm màu đỏ bằng cách ngâm mẫu vào dung dịch đỏ Carmin khoảng 30 phút. Rửa sạch mẫu 3 lần bằng nước cất.

Lên tiêu bản

Vi phẫu sau khi được nhuộm, được lên kính theo phương pháp giọt ép.

Cách thực hiện như sau:

Nhỏ vào giữa phiến kính 1 giọt chất lỏng được dùng làm môi trường quan sát (nước, glycerin, vv.), dùng kim mũi mác hoặc bút lông đặt vi phẫu cần quan sát vào giọt chất lỏng. Đậy lá kính lại (chú ý không để lẫn bọt khí dưới lá kính).

Có 2 cách đặt lá kính:

1. Cách 1: Đặt một cạnh lá kính tỳ vào bề mặt của phiến kính, bên cạnh giọt
   chất lỏng. Dùng kim mũi mác đỡ lấy cạnh đối diện rồi hạ từ từ xuống
2. Cách 2: Nhỏ 1 giọt chất lỏng (cùng loại với chất lỏng trên phiến kính) vào giữa lá kính. Lật ngược lá kính lại rồi hạ từ từ đây lên giọt chất lỏng trên phiến kính. Khi 2 giọt chất lỏng chạm nhau thì bỏ tay ra. Sau khi đậy lá kính, chất lỏng dưới lá kính phải vừa đủ để chiếm toàn bộ diện tích của lá kính, không thừa chảy ra ngoài và cũng không thiếu. Nếu thiếu, dùng một ống hút nhỏ thêm chất lỏng đã dùng để lên kính vào. Nếu thừa, dùng một mảnh giấy lọc để hút đi. Trong một số trường hợp cần phải thay đổi chất lỏng mà không muốn bỏ lá kính ra thì làm như sau: ở một cạnh của lá kính, đặt một miếng giấy lọc để hút chất lỏng đang ở dưới lá kính. ở cạnh đối diện, dùng ống hút cho giọt chất lỏng mới vào thay thế . Khi cho chất lỏng mới vào thì đồng thời hút chất lỏng cũ ra. Chất lỏng mới sẽ thay thế cho chất lỏng cũ dưới lá kính.

Tiêu bản đạt tiêu chuẩn phải mỏng, sáng, sạch, màu xanh và đỏ rõ ràng, chất lỏng dưới lá kính phải vừa đủ, chiếm toàn bộ diện tích lá kính, không chứa bọt khí, có thể quan sát dễ dàng.

5.   Phương pháp chọc hút bằng kim nhỏ:  Phương pháp lấy mẫu này thường được sử dụng để chẩn đoán nốt sần, u nang hoặc áp xe dưới da (a). Các tổn thương nhỏ (<1 cm) rất khó lấy mẫu bằng phương pháp này. Đối với quy trình này, ưu tiên sử dụng loại kim cỡ 22 hoặc nhỏ hơn. Các loại kim tiêm được khuyến nghị thường xuyên nhất là loại kim tiêm dùng một lần 10 hoặc 20 ml với kim cỡ 20–25 (b). Sau khi chọc hút vào tổn thương các mẫu thu được dàn lên các lam kính.

– Khi thu mẫu phải nắm được các pháp luật về pháp lý ( Các loài thuộc sách đỏ, các loài, các khu vực cấm thu mẫu )

– Cần có hiểu biết, làm quen với các cây độc, các cây dễ gây dị ứng… Ví dụ Cây Sơn (Rhus verniciflua) dễ gây lở (lỏ sơn), các loài han gây ngứa, không để các chất độc,nhựa rơi vào mắt, đường hô hấp,  mồm…

Bạn đang đọc: Hướng dẫn thu mẫu và làm tiêu bản cây thuốc

– Chuẩn bị các dụng cụ thiết yếu : Dụng cụ chặt, đào như dao, kéo, búa rìu, thuổng, thước đo, cặp ép ..– Thu thập thực vật nhỏ, các bộ phận nhỏ cần có ống nhựa vặn nút kín ( hoàn toàn có thể đổ dung dịch cố định và thắt chặt vào trước ). Thu thập cây dưới nước và ở đầm lầy cần phải có túi nhựa, túi polyethylen, nên dùng loại túi kép .– Ghi chép vào sổ tay riêng, sử dụng bút chì đen thường ( Không dùng bút chì hoá học ) .– Cần có một bộ nhãn, chỉ để buộc vào từng mẫu tương ứng với ghi chép ngoài thực địa trong sổ tay .– Kích thước mẫu tiêu bản tiêu chuẩn trên quốc tế là 41 x 29 cm nên mọi vật mẫu thực vật cần phải sắp xếp theo tiêu chuẩn đó. Cây to hoặc dày bằng mọi cách cần phải làm cho có size tương thích với kích cỡ mẫu tiêu bản. Mẫu dày, cồng kềnh phải chẻ ra, sấy khô để khâu lên tiêu bản. Cây lớn hoàn toàn có thể lấy từng phần nhỏ .– Trong tự nhiên các thành viên trong cùng một loài hoàn toàn có thể có những đặc thù khác nhau về mặt hình thái nên thường thì phải chọn các mẫu tiêu biểu vượt trội và thu mẫu tối thiểu từ 2-3 thành viên .– Cây thảo, nhỏ thường thu cả cây, nỗ lực thu nhiều mẫu ở các thời hạn sinh trưởng, tăng trưởng khác nhau kèm hoa, quả, hat …– Khi đào rễ cần chú ý quan tâm tới những lá khô ở gốc ( nhiều lúc hoàn toàn có thể giúp ích cho việc định loại ), rửa hệ rễ và làm cho ráo nước ( nếu hoàn toàn có thể được ) .– Ghi chép ngoài thực địa cần chú ý quan tâm tới các dẫn liệu sắc tố, mùi vị, các tư liệu về địa chất. Cần ghi chép tại chỗ ( Không được tin vào trí nhớ vì hoàn toàn có thể quên, nhầm lẫn ). Nên ghi số lên nhãn và buộc vào mẫu bằng chỉ dai .– Có thể sử dụng các phương tiện đi lại chụp ảnh, quay phim để ghi lại các đặc thù giảm nhẹ quy trình ghi chép .– Mẫu mới thu hoàn toàn có thể đặt giữa hai lớp giấy bản hoặc báo. Thời gian giữ mẫu trong cặp ép đi thực địa nhờ vào vào điều kiện kèm theo thời tiết và thực chất của mẫu, tránh quá nóng, ẩm ( dễ làm rụng lá ở tiêu bản ) .

Sấy mẫu tiêu bản

– Ép và sấy cho cây khô là hai quy trình không tách rời nhau, trong khi sấy cần ép chặt mẫu để lá khỏi nhăn nheo, để mẫu cây nằm đúng vị trí định khâu mẫu .– Mẫu cây thu từ thực địa đem về nơi giải quyết và xử lý thường bị héo không ít. Sắp xếp mẫu cây trên giấy để cố định và thắt chặt trước khi sấy. Thường đặt trên tờ báo có size lớn gấp đôi size mẫu ( 50% làm nền, một nửa gập đậy lên ). Khi sắp xếp cần tuân thủ một số ít nguyên tắc :+ trong số các lá tối thiểu có một lá được lật ngược lên .+ Không để các bộ phận của cây đè lên nhau+ Nếu có hoa sắp xếp ép để hoàn toàn có thể nhìn thấy được bên trong hoa .+ Cần sắp xếp đều trên diên tích được cho phép ( không tập trung chuyên sâu vào phần giữa ) .+ Cây dài hoàn toàn có thể sắp xép theo hình chữ V, N hay hình khác .+ Nếu cần bỏ lá quan tâm giữ cuống lá ( để thấy được sự sắp xếp lá trên cây ) .+ Những phần nhỏ ( hoa, lá ) bị rụng cần đặt bên cạnh mẫu .+ Các bộ phận sử dụng làm thuốc hoàn toàn có thể dữ gìn và bảo vệ bằng cách phơi sấy khô hoặc ngâm trong các dịch dữ gìn và bảo vệ .Sau khi xếp mẫu lên tờ báo gập nửa tờ báo còn lại lên trên mẫu. Đặt các mẫu lên cặp ép ( không dày quá 40 cm ) buộc cặp ép lại sấy ở 35-400 C trong khoảng chừng 8-12 h. Trong quy trình sấy cần liên tục thông thoáng. Lấy cặp ép ra buộc lại, sấy cho đến khô .

Khâu mẫu cây lên tiêu bản

Giấy để khâu có kích thước 41 x 29 cm, thường làm bằng bìa trắng, với mẫu lớn hay mẫu gỗ cần có giấy dày, chắc hơn. Đặt mẫu cây thuốc đã ép. và sấy khô lên bìa và khâu vào bìa, dán giấy lên trên các nốt khâu ở mặt trái. Khi mẫu đã khâu xong ở góc phải phía dưới của tiêu bản người ta dán nhãn vào. Kích thước nhãn 8 x13 cm. Nội dung nhãn gồm các thông tin:

Xem thêm: Cách làm chuồng gà bằng lưới, bằng sắt khoa học cho trại nuôi gà

Số hiệu tiêu bảnTên, họ khoa họcTên thường gọi, tên địa phươngĐặc điểmNơi thu mẫuCông dụngNgày thu mẫuTên người thu mẫuNgười và ngày định tênCơ quan điều tra và nghiên cứu

Bảo quản mẫu tiêu bản khô

Những bài thuốc kinh nghiệm đơn giản của Hải Thượng Lãn ÔngMẫu cần dữ gìn và bảo vệ nơi khô ráo, tránh nấm mốc, mốimọt. Sắp xếp mẫu theo các quy ước để dễ tìm, tra cứu khi thiết yếu .

Bảo quản tiêu bản thực vật trong chất lỏng

Mẫu nhỏ hoàn toàn có thể gắn trên bản kính và ngâm trong dung dịch có thành phần :Ethanol ( 90 % ) 20 mlNước cất 10 mlfocmalin 1 mlAcid acetic đđ 1 mlCó thể thêm CuSO4 hoặc đồng acetat để giữ màu xanh của các mẫu cây .Các mẫu dược liệu sử dụng để tọa lạc hay để học tập hoàn toàn có thể dữ gìn và bảo vệ trong chất định hình lỏng. Chất định hình chuẩn thường là dung dịch formalin 4-6 % hoặc sử dụng dịch định hình có thành phần :Phenol 20 gAcid lactic đđ 20 g

       Glycerin          20g                               

Xem thêm: Bỏ túi 3 cách làm tinh dầu quế tại nhà vừa đơn giản vừa tiết kiệm

Nước 20 mlCuCl2 0,2 gAcetat đồng 0,2 g

Source: https://hemradio.com
Category : Mẹo hay cuộc sống

Đánh giá của bạn

Các bạn nếu không nghe được audio, vui lòng gửi thông báo ở phần bình luận bên dưới. Ad sẽ chỉnh sửa trong thời gian sớm nhất, thanks các bạn nhiều nhiều !