Methyl hóa xử lý dna với bisulfite bằng hóa chất
|
Techmart đã tham dự: Techmart Quốc tế Việt Nam 2015 Show Mô tả quy trình CN/TB: Methyl hóa DNA và ung thư tuyến tiền liệtMethyl hóa DNA là thêm nhóm methyl (-CH3) vào cytosine ở trình tự CpG. Kết quả của nhiều nghiên cứu đã đưa đến nhận định methyl hóa DNA xuất hiện ở giai đoạn đầu của các loại ung thư trước khi xuất hiện các triệu chứng lâm sàng nên có thể sử dụng chỉ thị methyl hóa DNA trong chẩn đoán sớm. Hơn nữa, tần xuất DNA bị methyl hóa ở các tế bào lành xung quanh khối u tăng cùng với tiến triển của khối u nguyên phát hoặc tái phát, di căn. Điều này đặc biệt có ý nghĩa cho điều trị cũng như tiên lượng tiến triển bệnh ung thư. Methyl hóa gen GSTP1 (Glutathione S transferase 1) không phát hiện ở các tế bào bình thường mà chỉ xảy ra ở ung thư tuyến tiền liệt. Đặc biệt, methyl hóa GSTP1 có liên quan với phân độ mô bệnh học của ung thư. Năm 2013, methyl hóa GSTP1 đã được cơ quan thuốc và thực phẩm Mỹ (FDA) cho phép sử dụng như dấu chuẩn thương mại để hỗ trợ chẩn đoán sớm ung thư tuyến tiền liệt. Bộ sinh phẩm “GSTP1-METHYL Test”Bộ sinh phẩm “GSTP1-METHYL Test” được xây dựng dựa vào kỹ thuật MSP (khuếch đại đặc hiệu methyl) sử dụng DNA đã xử lý với bisulfite. gồm các thành phần cho phản ứng khuếch đại DNA đã được xử lý bisulfite. Kỹ thuật này có nhiều ưu điểm như (i) có độ nhạy cao chỉ cần lượng mẫu nhỏ, có thể dùng mẫu không đồng nhất, kể cả mẫu đúc nến parafilm; (ii) Đặc hiệu cho CpG không phân bố trong trình tự enzyme cắt giới hạn. Đặc biệt, phương pháp MSP thao tác đơn giản, không đòi hỏi các trang thiết bị hiện đại nên rất phù hợp với các phòng thí nghiệm, các Labo xét nghiệm ở các nước đang phát triển. Bộ sinh phẩm“GSTP1-METHYL Test” cung cấp đầy đủ hóa chất cho 25 phản ứng nested PCR (mỗi phản ứng gồm hai vòng PCR, vòng thứ hai sử dụng khuôn là sản phẩm PCR vòng thứ nhất) bao gồm cả các đối chứng chuẩn kèm theo. Căn cứ vào sự xuất hiện hai loại băng DNA sẽ xác định được tình trạng methyl hóa GSTP1 trong mẫu bệnh phẩm. Đối với các mẫu bệnh phẩm có thể thu được kết quả gồm 3 trường hợp: - Mẫu chỉ có băng DNA 149 bp chứng tỏ GSTP1 không bị methyl hóa. - Mẫu chỉ có băng DNA 155 bp chứng tỏ GSTP1 bị methyl hóa. - Mẫu có đồng thời cả hai băng 149 bp và 155 bp chứng tỏ GSTP1 bị methyl hóa trên một allen hoặc còn lẫn các tế bào lành không có GSTP1 bị methyl hóa. Bộ sinh phẩm được bảo quản ở -20 0C. Độ nhạy kỹ thuật cho phép phát hiện 2 copy gen GSTP1 bị methyl hóa trong số 1000 bản copy không bị methyl hóa (0.2 %). Thử nghiệm bước đầu cho thấy bộ sinh phẩm có độ nhạy cao hơn so với bộ kit thương mại “CpG WIZ GSTP1 Amplification Kit” (Millipore). Đặc biệt dấu chuẩn methyl hóa GSTP1 có thể được phát hiện bằng kỹ thuật điện di hoặc bằng kỹ thuật lai điểm. Bộ sinh phẩm là kết quả khoa học công nghệ của đề tài KC.04.05/11-15. Lĩnh vực áp dụng:
Mức độ phát triển: Sản xuất thử nghiệm Ưu điểm CN/TB:Đảm bảo giá thành giảm 1/2 so với các bộ sinh phẩm nhập ngoại Hỗ trợ chẩn đoán sớm ung thư tuyến tiền liệt theo công nghệ mới sử dụng dấu chuẩn methyl hóa ADN (đã được cấp phép sử dụng của cơ quan thuốc và thực phẩm Mỹ FDA cuối năm 2013). Từ khóa: Bộ sinh phẩm; Bộ test chuẩn đoán ung thư sớm; Chuẩn đoán ung thư sớm; Bộ sinh phẩm xét nghiệm ung thư sớm; Xét nghiệm y học Công nghệ giọt treo âm thanh Echo acoustic là bước đột phá cho giải pháp tự động hóa với khả năng không dính, không nhiễm mẫu, độ chính xác và tốc độ cao trong thao tác hút nhả mẫu lỏng sử dụng năng lượng âm thanh (Với mẫu từ 2.5 đến 25 nL). Sóng âm thanh vận chuyển mẫu dưới dạng giọt treo với thể tích mẫu chính xác từ đĩa chứa cho tới đĩa đích treo. bên trên. Với dải sản phẩm rộng bao gồm: Echo 650 Liquid Handler Echo 655 Liquid Handler Echo 655T Liquid Handler Echo 650T Liquid Handler Echo 525 Liquid Handler Echo 555 Liquid Handler Biomek i7 Automated WorkstationDesigned for your evolving workflow priorities Representing the best of what made Biomek an industry leading liquid handler—combined with enhancements suggested by customers around the globe—the Biomek i7 Automated Workstation has been designed to optimize workflows and increase walk-away in mid- to high-throughput labs. Hệ thống tự động Biomek 4000Hệ thống xử lý chất lỏng nhỏ gọn phù hợp với các phòng thí nghiệm nhỏ và/hoặc các phòng thí nghiệm mới sử dụng loại hệ thống này. Hệ thống này hỗ trợ việc chuẩn hóa các thao tác pipet hàng ngày, duy trì chất lượng mẫu và tạo ra các kết quả đáng tin cậy, có độ lặp lại cao. – Phù hợp với các quy trình công suất nhỏ – 12 vị trí Deck – Khoảng thể tích pipet 1 – 1,000 µL – Nhiều công cụ pipet đơn kệnh và 8 kênh có thể thay thế cho nhau và các loại kẹp DNA Clean & Concentrator (DCC)Clean-up PCR and other enzymatic reactions in as little as 2 minutes: – Clean and concentrate up to 5 μg DNA with ≥ 6 μl elution in as little as 2 minutes with 0 μl wash residue carryover. – Column design allows DNA to be eluted at high concentrations into minimal volumes of water or TE buffer. – Eluted DNA is well suited for use in PCR, DNA sequencing, DNA ligation, endonuclease digestion, RNA transcription, radiolabeling, arrays, etc. DNA Clean & Concentrator (DCC)Clean-up PCR and other enzymatic reactions in as little as 2 minutes: – Clean and concentrate up to 5 μg DNA with ≥ 6 μl elution in as little as 2 minutes with 0 μl wash residue carryover. – Column design allows DNA to be eluted at high concentrations into minimal volumes of water or TE buffer. – Eluted DNA is well suited for use in PCR, DNA sequencing, DNA ligation, endonuclease digestion, RNA transcription, radiolabeling, arrays, etc. Quick-DNARapid purification of DNA from cells and whole blood: – Easy purification of high-quality DNA from whole blood, buffy coat, swabs, or cultured cells. – Protocol excludes the use of Proteinase K and organic denaturants for biofluid and cell samples.™ are fracture resistant and chemically insert. Quick-DNA Fungal/Bacterial KitEasily isolate DNA from tough-to-lyse fungi and bacteria: – Simple, efficient isolation of DNA from all types of tough-to-lyse fungi and bacteria in minutes. – Ultra-high density BashingBeads™ are fracture resistant and chemically insert. GeneProof Hepatitis C Virus (HCV) PCR KitGeneProof Hepatitis C Virus (HCV) PCR Kit applies PCR technology to detect RNA of HCV virus in patient samples. The kit has CE-IVD certification for |
